傳統(tǒng)生產(chǎn) GlcN 的方法是以海洋蝦 蟹殼為原料, 采用強(qiáng)酸逐步水解制備得到, 其過(guò)程耗費(fèi)時(shí) 間長(zhǎng)且需要消耗大量酸和能量, 在工業(yè)制備 GlcN 中會(huì)對(duì) 環(huán)境造成不利影響。因此, 直接以 N-乙酰氨基葡萄糖 (N-acetylglucosamine, GlcNAc)作為原料, 避免了由蝦蟹原 材料帶來(lái)的季節(jié)性和過(guò)敏性的問(wèn)題。恒溫培養(yǎng)箱(上海新苗醫(yī)療器械制造有 限公司); FA 20048 分析天平(精度 0.0001 g, 上海佑科儀 器儀表有限公司); SW-CJ-1FD 超凈工作臺(tái)(蘇州蘇潔凈 化設(shè)備有限公司); HR-T16M 臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)(湖南 赫西儀器裝備有限公司); JY96-IIN 超聲破碎儀(寧波新 芝生物科技股份有。

    將 PBS 用超純水稀釋至 0.005、0.010、0.050、0.100、 0.200 mol/L 濃度, 分別加入 GlcNAc 至底物終質(zhì)量濃度為 5 g/L。取 100 μL Pd-nagA 純酶與含有 5 g/L GlcNAc 上述 不同濃度緩沖液混合后置于水浴鍋 45℃下反應(yīng) 7 h, 采 用 OPA 法檢測(cè)產(chǎn)物 GlcN 的生成量。相對(duì)酶活力的計(jì) 算是以純水作為反應(yīng)緩沖液時(shí), 測(cè)得的酶活力定義為 100%。